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非洲猪瘟试剂盒

更新时间:2021-03-11

简要描述:

本非洲猪瘟试剂盒基于硅胶吸附柱核酸纯化技术,适用样本为全血、血清和拭子(包括鼻拭子、口腔拭子、环境取样拭子等),仅需裂解-过柱-洗涤-洗脱四个步骤即可获得高浓度、高纯度的DNA,无蛋白质污染。本试剂盒提取效率高,质量稳定可靠,操作方便、快捷。

  【产品简介】

  本非洲猪瘟试剂盒 基于硅胶吸附柱核酸纯化技术,适用样本为全血、血清和拭子(包括鼻拭子、口腔拭子、环境取样拭子等),仅需裂解-过柱-洗涤-洗脱四个步骤即可获得高浓度、高纯度的DNA,无蛋白质污染。本试剂盒提取效率高,质量稳定可靠,操作方便、快捷。

  用户需自备的试剂为无水乙醇或95%以上的医用酒精。

  非洲猪瘟试剂盒 【产品内容】

  产品组成规格使用说明

  溶液1-蛋白酶K1 mL

  溶液222 mL

  溶液310 mL使用前加入15mL无水乙醇

  溶液45 mL使用前加入20mL无水乙醇

  溶液54 mL

  DNA吸附柱50支

  收集管2mL50支

  离心管 1.5mL50支

  【使用前注意事项】

  1. 溶液3在使用前需加入15mL无水乙醇并充分混匀。

  2. 溶液4在使用前需加入20mL无水乙醇并充分混匀。

  3. 需自备若干离心管,本试剂盒提供的50支1.5mL离心管仅用于收集提取的DNA溶液。

  4. 以下操作如非指明,均在室温下进行。

  5. 本试剂盒赠送1支15mL的量取乙醇用管,所有使用无水乙醇的步骤均可用95%以上的医用酒精替代。

  6. 离心机于8000 rpm运行时,离心力应大于1400g;使用掌上离心机时,需将离心时间延长至1min。

  【操作步骤】

  1. 全血、血清样本:在1.5mL离心管中加入200μL样本。

  拭子样本: 将1个拭子置于离心管中,加入400μL无菌生理盐水,充分涡旋后,取200μL溶液置于1.5mL离心管中。

  2. 加入20μL蛋白酶K,涡旋或颠倒混合均匀,56℃孵育10min。(无加热设备的情况下可于室温静置孵育15min)

  3. 加入400μL溶液2,涡旋或颠倒混合均匀,56℃孵育5min。(无加热设备的情况下可于室温静置孵育5min)

  注意:当样本为全血时,静置5min后请于12000rpm离心2min,吸取上清至另一离心管。不产生沉淀的血清和拭子样本可省略离心步骤。

  4. 加入200μL无水乙醇,涡旋或颠倒混合均匀。

  5. 将DNA吸附柱置于收集管中,将上述溶液全转移到DNA吸附柱中,8,000 rpm离心30s,弃滤液。

  6. 向DNA吸附柱重新放回收集管中,加入400μL溶液3,8,000 rpm离心30s,弃滤液。

  注意:初次使用前需向溶液3瓶中加入15mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。

  7. 将DNA吸附柱重新放回收集管中,加入400μL溶液4,8,000 rpm离心30s,弃滤液。

  注意:初次使用前需向溶液4瓶中加入20mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。

  8. 将DNA吸附柱重新放回收集管中,8,000 rpm空转离心30s,弃滤液。将吸附柱打开置于室温5分钟,以彻底晾干。

  注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。

  9. 将DNA吸附柱置于新的1.5mL离心管中, 向吸附柱柱膜中央上方小心加入50μL 溶液5(此步骤请谨慎操作,枪头请勿接触柱膜),8,000 rpm离心30s,洗脱液即为DNA溶液。

  注意:洗脱体积不应少于30μL,体积过小影响回收效率。DNA溶液请置于-20℃冰箱中保存,避免反复冻融。

  【规格】 50次/盒

  【贮藏及有效期】室温(15-25℃)保存,有效期12个月。

 

 

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